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詳細(xì)解析糖原合成酶激酶(GSK3β)抗體的操作步驟
  • 發(fā)布日期:2019-11-25      瀏覽次數(shù):1606
    •    糖原合成酶激酶(GSK3β)抗體是用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)含量。
       
        糖原合成酶激酶(GSK3β)抗體的操作步驟:
        1、從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
        2、設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
        3、樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。
        4、除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
        5、棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿(mǎn)洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次。
        6、每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
        7、每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
       
        糖原合成酶激酶(GSK3β)抗體的注意事項(xiàng):
        1、嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
        2、洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過(guò)程中不要讓微孔干燥掉。
        3、消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。
        4、底物顯色液應(yīng)呈無(wú)色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。
        5、避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯(cuò)誤結(jié)果。
        6、在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。
        7、平衡至室溫后再打開(kāi)密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
        8、任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體。任何漂白成分都會(huì)破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。
        9、不能使用過(guò)期產(chǎn)品。
        10、如果可能傳播疾病,所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測(cè)裝置。
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